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Preguntas frecuentes
Inyección intracitoplasmática de esperma equino (ICSI)
¿Qué es la ICSI?
¿Qué pasos hay que seguir?
¿Cuáles son las indicaciones de la ICSI?
¿Cuál es el mejor momento para recoger ovocitos?
¿Con qué frecuencia se pueden recoger ovocitos mediante TVA?
¿Cuáles son las tasas de éxito?
¿Qué ocurre si un cliente desea recoger un ovocito maduro de un folículo estimulado dominante (DSF)?
¿Cómo preparo a mis yeguas receptoras (sustitutas) para un embrión producido in vitro (PIV)?
¿Existe alguna diferencia en las tasas de éxito entre las receptoras ciclistas y las no ciclistas?
¿Existe alguna diferencia en el porcentaje de éxito entre embriones "frescos" y "congelados"?
¿Cuáles son los costes estimados?
La inyección intracitoplasmática de espermatozoides (ICSI) consiste en inyectar un ovocito maduro con un único espermatozoide para generar un blastocisto que posteriormente se transfiere o congela. El proceso completo, desde que se recogen los ovocitos hasta que se puede crear un blastocisto viable, dura 12 días.
Las aspiraciones transvaginales (TVA, también conocidas como recogida de óvulos) se realizan bajo sedación permanente para recoger oocitos ("huevos") de los ovarios de las yeguas. Este procedimiento suele realizarse en régimen ambulatorio. A continuación, los ovocitos maduran en una incubadora durante 30 horas. Los que maduran se fecundan mediante ICSI y se incuban durante 7-10 días para generar blastocitos.
Hay infinidad de razones, pero las más comunes con las que nos encontramos son:
- Subfertilidad o infertilidad crónica secundaria a enfermedad cervical, uterina u oviductal.
- Disponibilidad limitada de semen
- Incapacidad para recoger embriones mediante los métodos tradicionales de reproducción y vaciado 7-8 días después de la ovulación.
- Fallos repetidos de ovulación
- Conservación de líneas genéticas valiosas
Cuando la yegua tiene el mayor número de folículos de entre 5 y 20 mm de tamaño, preferiblemente al menos 12 de ellos. Esto suele ocurrir cuando la yegua está fuera de celo o durante el periodo de transición. Algunos estudios han demostrado que los ovocitos recogidos de un folículo estimulado dominante (DSF) tienen ~70% de posibilidades de formar un blastocisto. Sin embargo, esto requiere más recursos y planificación. Además, un estudio reciente de nuestro laboratorio (publicado en JAVMA, octubre de 2022) mostró un mayor número de folículos cuando la yegua estaba en diestro en comparación con el estro, pero no hubo diferencia en las tasas de blastocistos entre las dos etapas del estro.
Normalmente cada 2-4 semanas, pero algunas yeguas pueden necesitar más tiempo para desarrollar suficientes folículos en sus ovarios para maximizar las tasas de éxito.
Varían, pero las tasas medias calculadas a partir de nuestro laboratorio y cuatro laboratorios comerciales de ICSI son:
- Tasa media de recuperación de ovocitos = 60% (es decir, >1 ovocito recogido de cada 2 folículos aspirados).
- Tasa media de maduración de los ovocitos = 55% de los ovocitos recogidos
- Índice medio de escisión = 65% por ovocito inyectado
- Tasa media de blastocistos = 15-20% por ovocito inyectado
- Tasa media de transferencia = 65% por blastocisto
- Media de blastocistos por sesión de TVA = >1,00
- Ejemplo
o La yegua tiene 20 folículos → 12 ovocitos recogidos → 7 ovocitos maduros → 1 blastocisto
Como se ha mencionado anteriormente, algunos estudios han demostrado mejores tasas de blastocistos a partir de ovocitos recogidos de un DSF. Los requisitos para la recogida de ovocitos DSF son:
- Al menos un folículo mayor o igual a 35 mm
- Buen edema uterino (puntuación subjetiva 2 ó 3)
- Cuello uterino relajado
- No tiene un CL detectable
- Administrar 1 ml de sucromato IM y 2,5 ml de hCG IV 22-24 horas antes de la hora prevista de la aspiración y programar la aspiración en consecuencia.
- Tenga en cuenta que algunos laboratorios de ICSI no aceptan oocitos DSF o exigen que se envíen en un medio especial; póngase en contacto con el laboratorio de ICSI para obtener más información.
Protocolo :
Los embriones PIV requieren una ventana de sincronía diferente y más ajustada que los embriones "normales". Las tasas de éxito más altas se registran cuando se transfieren a yeguas receptoras que han ovulado entre 3 y 5 días antes. Idealmente, queremos transferir CUATRO (4) días después de que la receptora ovule. En las siguientes páginas hay protocolos para receptoras Ciclantes y No Ciclantes.
- Debe recibir un embrión 3-5 días después de su ovulación
- La receptora debe ser inducida a ovular 5-7 días después de la aspiración de la yegua donante (o 1-3 días después de ICSI)
- Debe confirmarse el día de la ovulación
- Véase el CRONOGRAMA nº 1 al final de este documento.
- Cualificaciones
o Ningún folículo de más de 20 mm de tamaño
o Ningún CL detectable y/o progesterona sérica < 1 ng/mL - Tratamiento o Días 1, 2 y 3
- Véase el CRONOGRAMA nº 2
Destinatario no ciclista :
- Estradiol-17beta (3,33 mg/mL), 3 ml (10 mg), IM, una vez al día
o Días 4, 5 y 6
- Progesterona (50 mg/mL), 3 ml (150 mg), IM, una vez al día
En este momento, la única diferencia es que las yeguas receptoras no ciclistas deben ser suplementadas con progesterona hasta por lo menos 42 días, si no hasta 120 días cuando la unidad fetoplacentaria comienza a producir progestinas para mantener la preñez. Nuestro laboratorio presentó un estudio en 2021 en el que no observamos diferencias en las tasas de preñez a los 7 y 35 días postransferencia entre receptoras ciclistas y no ciclistas.
Nuestro laboratorio no ha observado ninguna diferencia en los últimos 3 años. En cambio, la calidad de la receptora y la sincronía parecen ser factores más importantes para establecer una gestación y producir un potro vivo que el hecho de que el embrión haya sido congelado o no.
Blastocisto = Embrión viable que puede transferirse a una yegua receptora adecuada o congelarse para una transferencia posterior.
Escisión = Término que describe la división celular activa, que es un signo de desarrollo embrionario temprano; en los caballos, la escisión debe producirse en el día 5 después de la ICSI.
Día 0 = Día de la ICSI
ICSI = inyección intracitoplasmática de espermatozoides; consiste en la fecundación de un ovocito maduro con un único espermatozoide.
PIV = producido in vitro; se utiliza para describir cómo se generó el embrión; es decir, embrión PIV.
Congelación = existen dos métodos para "congelar" embriones: (1) la vitrificación, que es el método más utilizado en nuestro laboratorio y en los laboratorios comerciales de ICSI a los que solemos recurrir; y (2) la congelación lenta, que es más habitual en Europa. Cuando se descongelan correctamente, no observamos diferencias en las tasas de transferencia entre los embriones vitrificados y los congelados lentamente.
TVA = Aspiración transvaginal. También conocido como recogida de óvulos (OPU), este método se utiliza para recoger ovocitos de los ovarios de las yeguas para su posterior ICSI.
